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一种呈现TD1稳转细胞及其构建方法、呈现TD1工程化外泌体及其制备方法和应用 

申请/专利权人:厦门星际诺康细胞科技有限公司

申请日:2022-05-10

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN114752627B

主分类号:C12N15/867

分类号:C12N15/867;C12N15/62;C12N5/10;C12N5/0775;A61K8/64;A61K8/98;A61K8/99;A61Q19/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.25#授权;2022.08.02#实质审查的生效;2022.07.15#公开

摘要:本发明涉及分子生物领域,特别涉及一种呈现TD1稳转细胞及其构建方法、呈现TD1工程化外泌体及其应用,其中,稳转细胞的构建方法为包括如下步骤:S100、将透皮肽TD1基因序列插入到外泌体膜蛋白的基因序列中获得融合蛋白表达载体;S200、将所述S100制得的融合蛋白表达载体和包装质粒共同转染293T细胞得到慢病毒;S300、将所述S200制得的慢病毒感染间充质干细胞即得所述稳转细胞。本发明将透皮肽TD1定向表达在间充质干细胞的外泌体膜上,呈现TD1的间充质干细胞外泌体在小鼠皮肤上涂抹后,能够透过皮肤进入血液循环。该呈现TD1工程化外泌体可应用添加在涂抹型化妆品中,使其成分易于被皮肤的吸收。

主权项:1.一种呈现TD1稳转细胞的构建方法,其特征在于,其包括如下步骤:S100、将透皮肽TD1基因序列定向插入到外泌体膜蛋白的基因序列中获得融合蛋白表达载体;其中,所述融合蛋白表达载体的序列如SEQIDNO.1所示;S200、将所述S100制得的融合蛋白表达载体和包装质粒共同转染293T细胞得到慢病毒;其中,所述包装质粒由PMDLgpRRE、pVSV-G和pRSV-Rev构成;每80~100万个293T细胞中加入1~3μg融合蛋白表达载体和1.5~3μg包装质粒;S300、将所述S200制得的慢病毒转染间充质干细胞即得所述稳转细胞。

全文数据:

权利要求:

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