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以氨磷汀为底物利用ATRP信号放大策略检测碱性磷酸酶的电化学试剂盒及使用方法 

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申请/专利权人:河南中医药大学

摘要:本发明公开了以氨磷汀为底物利用ATRP信号放大策略检测碱性磷酸酶的电化学试剂盒及使用方法,该试剂盒包括金电极、BPAA、EDC、NHS、氨磷汀、CuBr2Me6TREN、FMMA、AA、LiClO4、DMSO、超纯水、Tris‑HCl缓冲溶液。本发明使用ATRP作为信号放大策略,避免了目前常用信号放大策略中纳米材料和生物酶的使用,在信号能够成倍放大,灵敏度极大提高的同时,稳定性和重现性也相对较高。相比于传统的ALP检测方法,电化学方法能够对生物反应发生进行实时监测并将其转换为电信号,这种类型的信号可以很容易地在微型设备中集成和观察。本发明试剂盒具有灵敏度高、操作简单和成本低廉等优点,有望用于医学领域ALP活性检测及抑制剂筛选。

主权项:1.一种以氨磷汀为底物利用ATRP信号放大策略检测碱性磷酸酶的电化学试剂盒,其特征在于,包括:金电极、α-溴苯乙酸BPAA、1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳二亚胺EDC、N-羟基琥珀酰亚胺NHS、氨磷汀、CuBr2Me6TREN、甲基丙烯酸二茂铁基甲酯FMMA、抗坏血酸AA、二甲基亚砜DMSO、LiClO4;所述试剂盒的使用方法,包括以下步骤:1EDC、NHS活化BPAA羧基将BPAA、EDC及NHS加入DMSO中,反应;2氨磷汀的水解将氨磷汀溶液与待检测样品溶液混合,反应;3金电极的修饰和ATRP反应①金电极的修饰:将步骤2的反应液滴加在金电极表面,反应,洗涤,吹干;②BPAA修饰:将修饰电极浸泡在步骤1的反应液中,反应,洗涤,吹干;③ATRP反应:依次向H2O中加入CuBr2Me6TREN溶液、FMMA溶液、AA溶液,混合均匀后,将电极浸泡在混合溶液中,反应;4SWV检测将步骤3所得电极浸入LiClO4溶液中,进行方波伏安法电化学测量。

全文数据:

权利要求:

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