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申请/专利权人：深圳湾实验室;深圳北京大学香港科技大学医学中心
申请日：2022-11-22
公开（公告）日：2024-05-28
公开（公告）号：CN118086462A
主分类号：C12Q1/682
分类号：C12Q1/682;C12Q1/6804
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.14#实质审查的生效;2024.05.28#公开
摘要：本发明涉及一种Northern杂交检测RNA剪接反应底物的方法，以线性化的双链DNA片段作为模版，体外转录合成不含放射性同位素标记的pre‑mRNA底物；Northern杂交的过程中，使用尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离RNA分子，通过膜转印将RNA分子转移至带正电的尼龙膜上，紫外交联固定后进行预杂交反应，再使用地高辛标记的DNA探针进行杂交反应，洗涤后进行封闭，再孵育偶联辣根过氧化物酶HRP的地高辛抗体，完成后进行化学发光反应并检测。整个检测过程安全、高效、灵敏。
主权项：1.一种Northern杂交检测RNA剪接反应底物的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1、设计针对目标RNA底物的DNA探针；步骤S2、体外转录合成pre-mRNA底物；步骤S3、分离RNA样品；步骤S4、将分离后的RNA快速转移至膜上并交联固定；步骤S5、预杂交后使用设计的探针进行杂交；步骤S6、去除非特异性杂交信号后，使用与DNA探针对应的抗体进行孵育；步骤S7、洗涤后通过化学发光法检测信号。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 深圳湾实验室;深圳北京大学香港科技大学医学中心 一种Northern杂交检测RNA剪接反应底物的方法
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