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申请/专利权人：深圳新合睿恩生物医疗科技有限公司;北京新合睿恩生物医疗科技有限公司;深圳市新合生物医疗科技有限公司
申请日：2024-03-22
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN118240926A
主分类号：C12Q1/6869
分类号：C12Q1/6869;C12N15/11
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.25#公开
摘要：本发明公开了一种测定未知RNA序列的方法，首先借助T4RNALigase2,truncated酶在RNA的3’端特异性连接5’端腺苷化及3’端封闭修饰的Linker；再采用与Linker互补的引物进行反转录获得cDNA；接着采用羧基磁珠对获得的cDNA进行纯化；然后借助TdT在cDNA的3’端添加polyC尾；再对未知序列RNA的cDNA片段采用降落PCR进行特异性扩增；最后采用sanger测序，即可获得其具体的序列信息。本发明的测定未知RNA序列的方法，不受限于特定类型的RNA，可广泛应用于各种未知RNA序列的研究，为研究者提供了一种灵活而高效的选择，且本发明方法易于操作、经济实惠，适用于各种科研需求。
主权项：1.一种测定未知RNA3’端序列的方法，其特征在于，包括以下步骤：1、利用T4RNALigase2,truncated酶，将5’端腺苷化，3’封闭修饰的Linker连接至待测RNA的3’端；2、采用与步骤1所述Linker的互补序列作为引物，对步骤1的连接有Linker的待测RNA进行反转录，得到cDNA；3、以根据待测RNA的5’端设计的引物作为反向引物，Linker的互补序列+M13R序列作为正向引物，对步骤2的cDNA进行PCR扩增；4、对PCR产物进行Sanger测序，即可测定未知RNA的3’端序列。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 深圳新合睿恩生物医疗科技有限公司;北京新合睿恩生物医疗科技有限公司;深圳市新合生物医疗科技有限公司 测定未知RNA序列的方法
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