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一种PM2.5对DTT消耗的测量方法 

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申请/专利权人:南京信息工程大学

摘要:本发明涉及一种PM2.5对DTT消耗的测量方法,在该测试方法中,将测试环境划分为PM2.5样品暴露在空气中,以及PM2.5样品与空气隔绝两个不同的环境,通过对比在这两种不同环境中PM2.5的萃取以及对的DTT消耗,进而准确掌握样品前处理级测试中空气对DTT消耗的影响,更进一步的可以精确掌握PM2.5在完全隔绝空气的条件下对DTT的消耗,进而通过精确的DTT消耗更加准确的实现对氧化潜势OP的分析。进一步的,本申请的测量方法中还排除了DTNB对测试结果准确性的影响。

主权项:1.一种PM2.5对DTT消耗的测量方法,其特征在于,该方法在氮气保护条件下进行,具体包括以下步骤:步骤SS1:切割一份直径22mm样品膜放入棕色玻璃瓶中,在氮气保护条件下用5mL去离子水在300~400rpm的条件下超声处理0.5~1.5小时得到萃取液;步骤SS2:将超声处理后的萃取液用蠕动泵连接直径为0.22µm的聚四氟乙烯注射式过滤器过滤以去除不溶物质得到PM2.5水溶性样品溶液并放到样品瓶中;步骤SS3:向混合管MT中加入缓冲液,然后将1.5mL步骤SS2制备的PM2.5水溶性样品溶液通过注射泵A输送到混合管MT中;步骤SS4:通过注射泵A添加0.5mL二硫苏糖醇到MT中,在37°C的温度下振动4分钟,振动电机以400rpm的旋转频率连续摇动,即得反应试样;步骤SS5:在间隔时间为0、11、22、33、44、55分钟的条件下,注射泵A通过多位阀转移等分反应试样于装有0.5mL浓度为4.5%wv的三氯乙酸TCA溶液的反应管RT中,制得测试中间物;步骤SS6:使用注射泵B通过多位阀将等量的5,5'-二硫代双-2-硝基苯甲酸DTNB抽出至RT中并混合150秒,即得测试试样2-硝基-5-硫代苯甲酸TNB;步骤SS7:氮气保护下,使用注射泵A通过多位阀将相同的Tris缓冲液添加到步骤SS6制得的测试试样反应管RT中,30秒后,将测试试样反应管RT中的最终混合溶液添加到分光光度计内的比色皿中,并测量最终混合物在412nm和700nm处的吸光度;步骤SS8:使用注射泵B抽出RT中残留的液体,然后通过注射泵B向RT中加入去离子水,再抽干去离子水,反复两次,以清洗RT,再向RT中添加0.5mLTCA溶液;重复步骤SS5至SS8,直到完成反应55分钟后的采样;所述步骤SS7中吸光度的值用W表示,其具体获得方式为:W=R-M,即W是减去DTNB的吸光度后的TNB的校正吸光度值;其中,R=C1-C2,即TNB+DTNB在412nm处的实际吸光度减去TNB+DTNB在700nm处的实际吸光度,即R表示添加DTNB时净DTT溶液排除700nm波长处的的杂散吸光度值的净吸光度值;其中,C1=R1-A1,即用TNB+DTNB的在412nm波长处的吸光度值减去去离子水在412nm波长处的吸光度值,得到TNB+DTNB在412nm处的实际吸光度;其中,R1是添加DTNB时不同DTT溶液浓度在412nm波长处的的吸光度值,即TNB+DTNB在412nm波长处的的吸光度值;A1是去离子水在412nm波长下的吸光度值;C2=R2-B1,即用TNB+DTNB的在700nm波长处的吸光度值减去去离子水在700nm波长处的吸光度值,得到TNB+DTNB在700nm处的实际吸光度;其中,R2是添加DTNB时不同DTT溶液浓度在700nm波长下的吸光度值,即TNB+DTNB在700nm波长下的吸光度值;B1是去离子水在700nm波长下的吸光度值;M=M1-A1-M2-B1,M1-A1表示未添加DTNB时DTT在412nm波长下的吸光度值减去去离子水在412nm波长下的吸光度,M2-B1表示未加DTNB时DTT在700nm波长下的吸光度值减去去离子水在700nm波长下的吸光度值,M代表未加DTNB时DTT在412nm波长下和700nm波长下TNB和水的吸光度的差值;其中,M1代表未添加DTNB时DTT在412nm波长下的吸光度值;M2代表未添加DTNB时DTT在700nm波长下的吸光度值。

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