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申请/专利权人：上海交通大学医学院附属仁济医院
申请日：2024-04-18
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN118222487A
主分类号：C12N5/071
分类号：C12N5/071;C12N5/0786;C12Q1/02
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.21#公开
摘要：本申请涉及生物医药领域，公开了一种仿非酒精性脂肪肝炎NASH的类器官、其快速构建的方法及其应用。所述方法包括以下步骤：分离特殊饮食诱导的NASH小鼠脂肪样变的原代肝细胞，培养并进行状态维持；肝细胞聚集为无载体支架的细胞球；将细胞球进行鉴定；培养原代肝星状细胞以及骨髓来源的巨噬细胞并进行鉴定；将巨噬细胞以及肝星状细胞加入肝细胞球中培养；三种类型细胞组装为无载体支架的细胞类器官；将类器官进行鉴定；在类器官模型中加入临床试验中被证实具有较好治疗作用的药物刺激，对该类器官进行药物反应测试评估。本申请的方法简单，不需基因编辑，培养周期较短，形成的类器官大小均一，便于药物的筛选。
主权项：1.一种仿非酒精性脂肪肝炎的类器官的快速构建方法，其特征在于，在所述方法中，脂肪样变的肝细胞三维球与非实质细胞共培养，所述方法包括以下步骤：步骤1，分离特殊饮食诱导的NASH小鼠脂肪样变的原代肝细胞，将肝细胞放置于低粘附96孔板培养，添加维持培养基进行状态维持；步骤2，4-5天后，肝细胞自动聚集为无载体支架的细胞球；步骤3，将步骤2得到的细胞球进行鉴定，确认表达成熟肝细胞标志物，以及大量脂质的累积；步骤4，培养原代肝星状细胞以及骨髓来源的巨噬细胞并进行鉴定；步骤5，将巨噬细胞以及肝星状细胞加入步骤3得到的肝细胞球中培养，培养方式为摇床水平圆周运动培养；步骤6，3天后，三种类型细胞自动组装为无载体支架的细胞类器官；步骤7，将步骤6得到的类器官进行鉴定，确认该类器官内包含脂肪样变的肝细胞及非实质细胞；步骤8，在步骤7得到的类器官模型中加入临床试验中被证实具有较好治疗作用的药物刺激，对该类器官进行药物反应测试评估。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海交通大学医学院附属仁济医院 一种仿非酒精性脂肪肝炎（NASH）的类器官、其快速构建的方法及其应用
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